Hemograma
As amostras devem estar com uma quantidade de anticoagulante compatível para que não ocorram diluições, alterações morfológicas ou coagulação. O anticoagulante utilizado é o EDTA 10%, o qual conserva melhor a morfologia das células sanguíneas.

• Uso do anticoagulante mais indicado: EDTA. O EDTA (Ácido Etileno Diamino Tetracético) remove o cálcio necessário à coagulação e é o anticoagulante mais indicado para contagens de células sanguíneas porque induz uma anticoagulação completa com mínimos efeitos sobre as células.

• Ausência de hemólise, fibrina ou microcoágulos, pois a presença destes causa alterações nas contagens celulares.

• A amostra deve ser enviada ao laboratório rapidamente. Diversos pesquisadores afirmam que o contato prolongado com o EDTA (principalmente à temperatura ambiente) pode induzir a formação de agregados celulares e alterar os resultados das contagens (ex. pseudo-trombocitopenia).

• Se caso não for possível o envio dentro de um curto período, preserve sua amostra a uma temperatura de 4ºC até no máximo 24 horas (obs: o esfregaço sangüíneo deve ser feito até no máximo 3 horas após a coleta).

• Manter sempre a proporção de sangue e anticoagulante correta obter qualidade e quantidade de volume necessário ao exame. (1 de gota de EDTA para 3 a 5 ml de sangue). O excesso de anticoagulante pode acarretar em:

• Destruição das plaquetas com resultados falsos de trombocitopenia;
• Degeneração citoplasmática dos neutrófilos, com presença de corpúsculos intracitoplasmáticos que não se pode reconhecer se são bacterianos ou de outra etiologia;
• Vacuolização de monócitos;
• Destruição e hemólise das hemácias com resultados falsos de hemoglobina e hematócrito;
• Não deve ser utilizado material reciclado. Os produtos utilizados para limpeza podem levar a uma destruição generalizada das hemácias e degeneração de todas as formas sangüíneas. Todas as amostras obtidas sob estas condições deveriam ser descartadas, já que se perde confiabilidade diagnóstica, tempo e dinheiro.

• Homogeneizar cuidadosamente o tubo com sangue por inversão, por 4 a 5 vezes, logo após a coleta para evitar o processo de coagulação.

Normalmente, quando estes cuidados não são tomados, algumas amostras podem apresentar hemólise ou lipemia (principalmente para exames bioquímicos).

Ao escolher o material de coleta deve-se pensar no calibre da agulha que será utilizada, pois se o calibre for menor que 25x07 pode ocorrer um excesso de sucção, levando à hemólise. A hemólise causa alterações nas dosagens de enzimas (ex. AST, ALT, Fosf. Alcalina).

A presença de lipemia também pode levar à hemólise. A lipemia é observada visualmente por sua coloração esbranquiçada, enquanto que a hemólise requer uma centrifugação prévia. A hemólise causa no plasma um aumento dos constituintes que estão contidos dentro da hemácia ou diminui os elementos presentes no soro. A lipemia pós-prandial pode ser eliminada pelo jejum do animal (12 horas) antes de se colher a amostra. Homogeneizá-lo lentamente e enviar ao laboratório no prazo máximo de 24 horas. Utilizar gelo como conservador.

Podemos encontrar hemólise em algumas doenças, mas normalmente é verificada como resultado de dificuldades no manuseio da amostra por vários motivos, como aplicação de pressão excessiva na seringa ao se transferir o sangue para frascos, agitação excessiva, estocagem prolongada do sangue, principalmente se tiver sido exposto a altas temperaturas.